原理是由一對引物介導(dǎo)，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

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實驗過程：
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)原理：
 DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

細(xì)菌篩選培養(yǎng)基/Bacterium Screening MediumBR100克國產(chǎn)/進(jìn)口

正常人結(jié)腸組織細(xì)胞英文名稱：CCD-18Co

產(chǎn)品名稱 規(guī)格： 規(guī)格 用途： 用途

三葉草瘤菌 Rhizobium trifolii青霉屬 Penicillium sp.

5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基/5% Dextrose Broth Medium藥品細(xì)菌培養(yǎng)，滴眼劑金黃色葡萄球菌培養(yǎng)等250克國產(chǎn)/進(jìn)口

布氏瓊脂/Brucella Agar彎桿菌的抗生素敏感性試驗和純化培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口

TAT肉湯/胰蛋白胨大豆卵磷脂聚山梨酸酯瓊脂/胰酶大豆卵磷脂聚山梨酸酯瓊脂/胰酪胨大豆卵磷脂聚山梨酸酯瓊脂/TAT Broth化妝品和藥品中微生物檢測250克國產(chǎn)/進(jìn)口

大鼠肝細(xì)胞英文名稱：BRL

Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit/Nc-細(xì)胞核-漿蛋白抽提試劑盒人原髓細(xì)胞白血病細(xì)胞

細(xì)菌總數(shù)顯色培養(yǎng)基/Total Genes Chromogenic Medium檢測細(xì)菌總數(shù)，培養(yǎng)24小時，細(xì)菌顯紅色250毫升國產(chǎn)/進(jìn)口

人支氣管上皮細(xì)胞英文名稱：BEAS-2B

禽腎炎病毒通用PCR檢測試劑盒廠家磺酰  172.2  Benzenesulfonylhydrazine*：80-17-1分子量： C6H8N2O2S

4,7-二溴-2,1,3-并硒二唑  340.86  4,7- -2,1,3- two with benzene and selenium bromide*：63224-42-0分子量： C6H2Br2N2Se

2-羥乙  129.2  2- hydroxyethyl piperidine*：1484-84-0分子量： C7H15NO

2--5-溴-3-硝三氟甲    2- amino -5- -3- nitro three f*：157026-18-1分子量：

5-乙尿嘧  140.14  5- ethyl uracil*：4212-49-1分子量： C6H8N2O2

紫杉葉素  Taxol.  304.256分子量：C15H12O7*：480-18-2

環(huán)戊二二羰鐵二聚體  353.92  Two two cyclopentadienyl carbonyl iron dimer*：12154-95-9分子量： C14H10Fe2O4

五味子酯甲  A, a  536.56968分子量：C30H32O9*：58546-56-8

對四聯(lián)  306.41  P-quaterphenyl*：135-70-6分子量： C24H18

4,4'-二八氟聯(lián)  328.17  4,4'- two amino eight fluorine*：1038-66-0分子量： C12H4F8N2

三氯乙  Trichloroethylene  131.39分子量： C2HCl3*：28861